本发明提供一种以罗丹明B为荧光标记的多胺铜配合物及其检测一氧化氮的方法。以罗丹明B为荧光标记物，以对铜离子有强配位能力的多胺类化合物：三(2-氨基乙基)胺及其衍生物，二乙烯三胺及其衍生物和四氮杂环及其衍生物为配体，与铜盐反应得到一系列铜配合物，其结构通式如下：RB-LN+Cu2+→CuRBLN该类铜配合物能选择性的识别水体系及生命体系中的NO，响应迅速，检测限低至1nM，并且已成功应用于NO细胞荧光成像。因此，该类铜配合物在检测生命体中NO，研究其生理和病理机制上具有良好的应用前景。